核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)要靠高投入采購(gòu)高品質(zhì)的試劑和儀器來提高檢測(cè)的靈敏度，但是當(dāng)檢測(cè)量非常大的時(shí)候，誰也不能保證百分之百不出問題。核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確的核心應(yīng)該是人和嚴(yán)格的試驗(yàn)流程和管理制度。我們能做的是隨時(shí)保持警惕，盡早發(fā)現(xiàn)，及時(shí)處置，最大程度減少損失。核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室發(fā)生污染如何緊急處理呢？下面博爾實(shí)驗(yàn)室小編根據(jù)實(shí)驗(yàn)室工作人員的一次親身經(jīng)歷來為大家解答。

         實(shí)驗(yàn)員發(fā)現(xiàn)在一次qPCR實(shí)驗(yàn)中雖然陰性對(duì)照成立，但是4份陰性樣品出現(xiàn)了擴(kuò)增曲線?？梢源_定實(shí)驗(yàn)中發(fā)生了污染，但是從何時(shí)開始污染的？污染源是什么？影響到的試驗(yàn)有多少？這個(gè)時(shí)候我們需要一一排查，實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生污染，第一時(shí)間不是糾結(jié)于到底哪里污染了，到底誰的責(zé)任導(dǎo)致的污染。絕大多數(shù)時(shí)間我們無法確定污染源，更不能輕易排除一項(xiàng)污染源。而是第一時(shí)間果斷采取清除污染的措施。做好如下工作：

         1.停止所有實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，查看當(dāng)天所有的試驗(yàn)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)只有一個(gè)實(shí)驗(yàn)受到了污染。

         2.清理試劑準(zhǔn)備區(qū)、核樣本制備區(qū)和擴(kuò)增區(qū)所有開封的試劑耗材；

         3.離心管架、試管架等可重復(fù)使用的物品浸泡到84消毒液中過夜，第二天用清水清洗后晾干使用；

         4.對(duì)移液器內(nèi)外表面、核酸提取儀內(nèi)部先用酒精擦拭后，再用核酸去除劑擦拭，同時(shí)啟用備用的移液器；

         5.對(duì)各區(qū)的生物安全柜、潔凈工作臺(tái)和實(shí)驗(yàn)臺(tái)面先用酒精擦拭后，再用核酸去除劑擦拭；

         6.對(duì)實(shí)驗(yàn)室地面用84消毒液進(jìn)行清潔；

         7.開窗通風(fēng)。

         污染清除的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證

         1.在試劑準(zhǔn)備區(qū)的潔凈工作臺(tái)面、樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)部、核酸提取儀內(nèi)部和擴(kuò)增區(qū)臺(tái)面分別放置開蓋裝有PBS的離心管，過夜；

         2.用采樣拭子蘸PBS后對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、生物安全柜臺(tái)面和潔凈工作臺(tái)面反復(fù)擦拭后，放入PBS中進(jìn)行洗脫。

         3.用采樣拭子蘸PBS后對(duì)移液器的內(nèi)外表面進(jìn)行取樣，取樣后放入PBS中進(jìn)行洗脫。

         4.將配液的移液器和加模板的移液器換上無濾芯槍頭，在PBS中反復(fù)吹吸10次，測(cè)試移液器內(nèi)部是否存在污染。

         5.測(cè)試結(jié)果

         5.1測(cè)試結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器內(nèi)外表面擦拭拭子為核酸陽性，其他檢測(cè)都是陰性。

         5.2對(duì)樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器進(jìn)行清潔和擦拭后，第二天對(duì)該移液器內(nèi)表面和外表面擦拭拭子進(jìn)行檢測(cè)，仍有擴(kuò)增分別為39.89和39.63。

         5.3對(duì)樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器進(jìn)行清潔和擦拭后，過二天后對(duì)該移液器內(nèi)表面和外表面擦拭拭子進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為陰性。
持續(xù)監(jiān)測(cè)

         本次實(shí)驗(yàn)室污染事件發(fā)現(xiàn)到針對(duì)性解決，一共用時(shí)五天。最終可以確定是樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器發(fā)生了污染。但是由于可能造成污染的因素很多，移液器是否是唯一的污染因素我們很難確定。后續(xù)的幾天仍然在檢測(cè)中增加陰性對(duì)照，持續(xù)對(duì)環(huán)境等樣品進(jìn)行監(jiān)測(cè)，確保污染被徹底清除。

         很多檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室被持續(xù)的不定期核酸污染所困擾，很重要的原因是未能及時(shí)發(fā)現(xiàn)污染并在第一時(shí)間徹底的處理。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)該結(jié)合自己實(shí)驗(yàn)室的情況建立規(guī)范的污染處置規(guī)程，確保在下一次污染發(fā)生時(shí)能盡早盡快解決。